RT-PCR을 깔끔하게 하고 싶은 유저들에게 Tip
• 깨끗한 RNA 추출을 위해 Prep 제품을 사용
Ex) Takara, gDNA 제거용 컬럼이 포함된 MiniBest Universal RNA Extraction Kit (9767A)
• 고차구조의 RNA를 주형으로 사용할 때, RTase에 악세서리 단백질 추가
Takara, PrimeScript Reverse Transcriptase Kit (6210A 외) 시리즈를 사용하면 cDNA 합성 시 여러 저해 요인
(①고차구조의 RNA, ②mis-priming에 의한 신장 ③역전사효소의 비특이적 결합)을 극한까지 억제시킬 수 있습니다.
• 어려운 서열을 정확하게 증폭하고 싶을 떄는 신장인자가 첨가된 PCR 효소를 사용
Prime STAR GXL DNA Polymerase (R050A) 는 기본 효소에 신장인자를 첨가해서 Human genomic DNA(gDNA)는 최대 30 kb,
λDNA는 최대 40kb까지 증폭가능하고 GC-rich나 AT-rich template 증폭에도 적합합니다.